కణ సంస్కృతి కాలుష్యం ప్రభావవంతంగా తగ్గించబడింది

కణ సంస్కృతిని కలుషితం చేయడం అనేది కణ సంస్కృతి ప్రయోగశాలలలో అత్యంత సాధారణ సమస్యగా మారుతుంది, కొన్నిసార్లు చాలా తీవ్రమైన పరిణామాలకు కారణమవుతుంది.కణ సంస్కృతి కలుషితాలను రెండు వర్గాలుగా విభజించవచ్చు, మీడియం, సీరం మరియు నీటి మలినాలు, ఎండోటాక్సిన్‌లు, ప్లాస్టిసైజర్లు మరియు డిటర్జెంట్లు వంటి రసాయన కలుషితాలు మరియు బ్యాక్టీరియా, అచ్చులు, ఈస్ట్‌లు, వైరస్‌లు, మైకోప్లాస్మా క్రాస్ ఇన్‌ఫెక్షన్ వంటి జీవసంబంధమైన కలుషితాలు.ఇతర సెల్ లైన్ల ద్వారా కలుషితం.కాలుష్యాన్ని పూర్తిగా తొలగించడం అసాధ్యం అయినప్పటికీ, దాని మూలాన్ని పూర్తిగా అర్థం చేసుకోవడం మరియు మంచి అసెప్టిక్ పద్ధతులను అనుసరించడం ద్వారా దాని ఫ్రీక్వెన్సీ మరియు తీవ్రతను తగ్గించవచ్చు.

1.ఈ విభాగం జీవ కాలుష్యం యొక్క ప్రధాన రకాలను వివరిస్తుంది:
బాక్టీరియల్ కాలుష్యం
అచ్చు మరియు వైరస్ కాలుష్యం
మైకోప్లాస్మా కాలుష్యం
ఈస్ట్ కాలుష్యం

1.1 బాక్టీరియా కాలుష్యం
బాక్టీరియా అనేది సర్వవ్యాప్త ఏకకణ సూక్ష్మజీవుల యొక్క పెద్ద సమూహం.అవి సాధారణంగా కొన్ని మైక్రాన్ల వ్యాసం కలిగి ఉంటాయి మరియు గోళాల నుండి రాడ్‌లు మరియు స్పైరల్స్ వరకు వివిధ ఆకారాలలో రావచ్చు.వాటి సర్వవ్యాప్తి, పరిమాణం మరియు వేగవంతమైన వృద్ధి రేటు కారణంగా, బ్యాక్టీరియా, ఈస్ట్‌లు మరియు అచ్చులతో పాటు, కణ సంస్కృతిలో అత్యంత సాధారణ జీవ కలుషితాలు.

1.1.1 బాక్టీరియల్ కాలుష్యం యొక్క గుర్తింపు
బాక్టీరియల్ కాలుష్యం సోకిన కొద్ది రోజులలో సంస్కృతి యొక్క దృశ్య తనిఖీ ద్వారా సులభంగా గుర్తించబడుతుంది;
సోకిన సంస్కృతులు సాధారణంగా మేఘావృతమై (అంటే, గందరగోళంగా), కొన్నిసార్లు ఉపరితలంపై సన్నని పొరతో కనిపిస్తాయి.
సంస్కృతి మాధ్యమం యొక్క pHలో ఆకస్మిక చుక్కలు కూడా తరచుగా ఎదురవుతాయి.
తక్కువ-శక్తి సూక్ష్మదర్శిని క్రింద, బ్యాక్టీరియా కణాల మధ్య కణికలు కదలకుండా చిన్నదిగా కనిపిస్తుంది మరియు అధిక-శక్తి సూక్ష్మదర్శిని క్రింద పరిశీలన వ్యక్తిగత బ్యాక్టీరియా యొక్క ఆకృతులను పరిష్కరించగలదు.

1.2 అచ్చు & వైరస్ కాలుష్యం
1.2.1 అచ్చు కాలుష్యం
అచ్చులు ఫంగల్ రాజ్యం యొక్క యూకారియోటిక్ సూక్ష్మజీవులు, ఇవి హైఫే అని పిలువబడే బహుళ సెల్యులార్ ఫిలమెంట్స్ రూపంలో పెరుగుతాయి.ఈ బహుళ సెల్యులార్ ఫిలమెంట్స్ యొక్క కనెక్టివ్ నెట్‌వర్క్‌లు కాలనీలు లేదా మైసిలియం అని పిలువబడే జన్యుపరంగా ఒకేలాంటి కేంద్రకాలను కలిగి ఉంటాయి.

ఈస్ట్ కాలుష్యం మాదిరిగానే, కాలుష్యం యొక్క ప్రారంభ దశలో సంస్కృతి యొక్క pH స్థిరంగా ఉంటుంది మరియు సంస్కృతి మరింత తీవ్రంగా సోకినప్పుడు మరియు మేఘావృతమై ఉండటంతో వేగంగా పెరుగుతుంది.సూక్ష్మదర్శిని క్రింద, మైసిలియం సాధారణంగా ఫిలమెంటస్‌గా ఉంటుంది, కొన్నిసార్లు బీజాంశాల దట్టమైన సమూహాలుగా ఉంటుంది.అనేక అచ్చుల బీజాంశాలు వాటి నిద్రాణ దశలో చాలా కఠినమైన మరియు ఆదరించని వాతావరణంలో జీవించగలవు మరియు సరైన వృద్ధి పరిస్థితులు ఎదురైనప్పుడు మాత్రమే సక్రియం చేయబడతాయి.

1.2.2 వైరస్ కాలుష్యం
వైరస్లు పునరుత్పత్తి కోసం హోస్ట్ సెల్ యొక్క యంత్రాంగాన్ని స్వాధీనం చేసుకునే మైక్రోస్కోపిక్ ఇన్ఫెక్షియస్ ఏజెంట్లు.వాటి అతి చిన్న పరిమాణం వాటిని సంస్కృతిలో గుర్తించడం మరియు సెల్ కల్చర్ ప్రయోగశాలలలో ఉపయోగించే కారకాల నుండి తీసివేయడం కష్టతరం చేస్తుంది.చాలా వైరస్‌లు వాటి అతిధేయల కోసం చాలా కఠినమైన అవసరాలను కలిగి ఉంటాయి కాబట్టి, అవి సాధారణంగా హోస్ట్ కాకుండా ఇతర జాతుల కణ సంస్కృతులను ప్రతికూలంగా ప్రభావితం చేయవు.
అయినప్పటికీ, వైరస్-సోకిన కణ సంస్కృతుల ఉపయోగం ప్రయోగశాల సిబ్బంది ఆరోగ్యానికి తీవ్రమైన ప్రమాదాన్ని కలిగిస్తుంది, ముఖ్యంగా మానవ లేదా ప్రైమేట్ కణాలు ప్రయోగశాలలో పెరిగినట్లయితే.

సెల్ కల్చర్‌లలో వైరల్ ఇన్‌ఫెక్షన్‌ను ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీ, యాంటీబాడీస్ సెట్‌తో ఇమ్యునోస్టెయినింగ్, ELISA లేదా తగిన వైరల్ ప్రైమర్‌లతో PCR ద్వారా గుర్తించవచ్చు.

1.3 మైకోప్లాస్మా కాలుష్యం
మైకోప్లాస్మా అనేది సెల్ గోడలు లేని సాధారణ బాక్టీరియా, మరియు అవి అతి చిన్న స్వీయ-ప్రతిరూప జీవులుగా భావించబడతాయి.వాటి అతి చిన్న పరిమాణం (సాధారణంగా 1 మైక్రాన్ కంటే తక్కువ) కారణంగా, మైకోప్లాస్మా చాలా ఎక్కువ సాంద్రతలను చేరుకునే వరకు మరియు కణ సంస్కృతి క్షీణించే వరకు గుర్తించడం కష్టం;అప్పటి వరకు, సాధారణంగా సంక్రమణకు స్పష్టమైన సంకేతాలు లేవు.

1.3.1 మైకోప్లాస్మా కాలుష్యాన్ని గుర్తించడం
కొన్ని నెమ్మదిగా-పెరుగుతున్న మైకోప్లాస్మాలు కణ మరణానికి కారణం కాకుండా సంస్కృతులలో కొనసాగవచ్చు, కానీ అవి సంస్కృతులలో హోస్ట్ కణాల ప్రవర్తన మరియు జీవక్రియను మారుస్తాయి.

దీర్ఘకాలిక మైకోప్లాస్మా ఇన్ఫెక్షన్ తగ్గిన కణాల విస్తరణ రేటు, తగ్గిన సంతృప్త సాంద్రత మరియు సస్పెన్షన్ సంస్కృతిలో సంకలనం ద్వారా వర్గీకరించబడుతుంది.
అయినప్పటికీ, మైకోప్లాస్మా కాలుష్యాన్ని గుర్తించడానికి ఏకైక విశ్వసనీయ మార్గం ఫ్లోరోసెంట్ స్టెయినింగ్ (ఉదా, హోచ్స్ట్ 33258), ELISA, PCR, ఇమ్యునోస్టెయినింగ్, ఆటోరాడియోగ్రఫీ లేదా మైక్రోబియల్ టెస్టింగ్‌లను ఉపయోగించి సంస్కృతిని క్రమం తప్పకుండా పరీక్షించడం.

1.4 ఈస్ట్ కాలుష్యం
ఈస్ట్‌లు ఫంగల్ రాజ్యానికి చెందిన ఏకకణ యూకారియోట్లు, ఇవి కొన్ని మైక్రాన్‌ల (సాధారణంగా) నుండి 40 మైక్రాన్‌ల (అరుదుగా) వరకు ఉంటాయి.

1.4.1 ఈస్ట్ కాలుష్యాన్ని గుర్తించడం
బ్యాక్టీరియా కాలుష్యం వలె, ఈస్ట్‌తో కలుషితమైన సంస్కృతులు మేఘావృతమవుతాయి, ముఖ్యంగా కాలుష్యం అధునాతన దశలో ఉంటే.ఈస్ట్‌తో కలుషితమైన సంస్కృతుల pH కాలుష్యం మరింత తీవ్రమయ్యే వరకు చాలా తక్కువగా మారుతుంది, ఆ దశలో pH సాధారణంగా పెరుగుతుంది.సూక్ష్మదర్శిని క్రింద, ఈస్ట్ వ్యక్తిగత అండాకార లేదా గోళాకార కణాల వలె కనిపిస్తుంది మరియు చిన్న కణాలను ఉత్పత్తి చేయవచ్చు.

2.క్రాస్ ఇన్ఫెక్షన్
సూక్ష్మజీవుల కాలుష్యం వలె సాధారణం కానప్పటికీ, హెలా మరియు ఇతర వేగంగా అభివృద్ధి చెందుతున్న కణ తంతువులతో అనేక కణ తంతువుల యొక్క విస్తృతమైన క్రాస్-కాలుష్యం అనేది తీవ్రమైన పరిణామాలతో స్పష్టంగా నిర్వచించబడిన సమస్య.ప్రసిద్ధ సెల్ బ్యాంకుల నుండి సెల్ లైన్లను పొందండి, సెల్ లైన్ల లక్షణాలను క్రమం తప్పకుండా తనిఖీ చేయండి మరియు మంచి అసెప్టిక్ పద్ధతులను ఉపయోగించండి.ఈ అభ్యాసాలు క్రాస్-కాలుష్యాన్ని నివారించడానికి మీకు సహాయపడతాయి.DNA వేలిముద్ర, కార్యోటైపింగ్ మరియు ఐసోటైపింగ్ మీ సెల్ కల్చర్‌లో క్రాస్-కాలుష్యం ఉందో లేదో నిర్ధారించగలవు.

సూక్ష్మజీవుల కాలుష్యం వలె సాధారణం కానప్పటికీ, హెలా మరియు ఇతర వేగంగా అభివృద్ధి చెందుతున్న కణ తంతువులతో అనేక కణ తంతువుల యొక్క విస్తృతమైన క్రాస్-కాలుష్యం అనేది తీవ్రమైన పరిణామాలతో స్పష్టంగా నిర్వచించబడిన సమస్య.ప్రసిద్ధ సెల్ బ్యాంకుల నుండి సెల్ లైన్లను పొందండి, సెల్ లైన్ల లక్షణాలను క్రమం తప్పకుండా తనిఖీ చేయండి మరియు మంచి అసెప్టిక్ పద్ధతులను ఉపయోగించండి.ఈ అభ్యాసాలు క్రాస్-కాలుష్యాన్ని నివారించడానికి మీకు సహాయపడతాయి.DNA వేలిముద్ర, కార్యోటైపింగ్ మరియు ఐసోటైపింగ్ మీ సెల్ కల్చర్‌లో క్రాస్-కాలుష్యం ఉందో లేదో నిర్ధారించగలవు.