కణ సంస్కృతి పర్యావరణం సెల్ ఉత్పత్తిని ప్రభావితం చేస్తుంది

కణ సంస్కృతి యొక్క ప్రధాన ప్రయోజనాల్లో ఒకటి కణ పునరుత్పత్తి (అంటే ఉష్ణోగ్రత, pH, ద్రవాభిసరణ పీడనం, O2 మరియు CO2 ఉద్రిక్తత) మరియు శారీరక వాతావరణం (అంటే హార్మోన్ మరియు పోషక సాంద్రత) యొక్క భౌతిక రసాయన శాస్త్రాన్ని మార్చగల సామర్థ్యం.ఉష్ణోగ్రతతో పాటు, సంస్కృతి పర్యావరణం వృద్ధి మాధ్యమం ద్వారా నియంత్రించబడుతుంది.

సంస్కృతి యొక్క శారీరక వాతావరణం దాని భౌతిక మరియు రసాయన వాతావరణం వలె స్పష్టంగా లేనప్పటికీ, సీరం భాగాలపై మంచి అవగాహన, విస్తరణకు అవసరమైన వృద్ధి కారకాల గుర్తింపు మరియు సంస్కృతిలోని కణాల సూక్ష్మ పర్యావరణంపై మంచి అవగాహన.(అంటే సెల్-సెల్ ఇంటరాక్షన్, గ్యాస్ డిఫ్యూజన్, మ్యాట్రిక్స్‌తో ఇంటరాక్షన్) ఇప్పుడు కొన్ని సెల్ లైన్‌లను సీరం-ఫ్రీ మీడియాలో కల్చర్ చేయడానికి అనుమతిస్తుంది.

1.సంస్కృతి వాతావరణం కణాల పెరుగుదలను ప్రభావితం చేస్తుంది
ప్రతి సెల్ రకానికి సెల్ కల్చర్ పరిస్థితులు భిన్నంగా ఉంటాయని దయచేసి గమనించండి.
నిర్దిష్ట కణ రకానికి అవసరమైన సంస్కృతి పరిస్థితుల నుండి వైదొలగడం యొక్క పరిణామాలు అసాధారణమైన సమలక్షణాల వ్యక్తీకరణ నుండి కణ సంస్కృతి యొక్క పూర్తి వైఫల్యం వరకు ఉంటాయి.అందువల్ల, మీకు ఆసక్తి ఉన్న సెల్ లైన్‌తో మీరు సుపరిచితులు కావాలని మరియు మీ ప్రయోగంలో మీరు ఉపయోగించే ప్రతి ఉత్పత్తికి అందించిన సూచనలను ఖచ్చితంగా పాటించాలని మేము సిఫార్సు చేస్తున్నాము.

2.మీ కణాల కోసం ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన సెల్ కల్చర్ వాతావరణాన్ని సృష్టించడానికి జాగ్రత్తలు:
కల్చర్ మీడియా మరియు సీరం (మరింత సమాచారం కోసం క్రింద చూడండి)
pH మరియు CO2 స్థాయిలు (మరింత సమాచారం కోసం క్రింద చూడండి)
ప్లాస్టిక్‌ని పండించండి (మరింత సమాచారం కోసం క్రింద చూడండి)
ఉష్ణోగ్రత (మరింత సమాచారం కోసం క్రింద చూడండి)

2.1 కల్చరల్ మీడియా మరియు సీరం
సంస్కృతి మాధ్యమం సంస్కృతి వాతావరణంలో అత్యంత ముఖ్యమైన భాగం, ఎందుకంటే ఇది కణాల పెరుగుదలకు అవసరమైన పోషకాలు, పెరుగుదల కారకాలు మరియు హార్మోన్లను అందిస్తుంది మరియు సంస్కృతి యొక్క pH మరియు ద్రవాభిసరణ ఒత్తిడిని నియంత్రిస్తుంది.

కణజాల పదార్దాలు మరియు శరీర ద్రవాల నుండి పొందిన సహజ మాధ్యమాన్ని ఉపయోగించి ప్రారంభ కణ సంస్కృతి ప్రయోగాలు జరిగినప్పటికీ, ప్రమాణీకరణ అవసరం, మీడియా నాణ్యత మరియు పెరిగిన డిమాండ్ ఖచ్చితమైన మీడియా అభివృద్ధికి దారితీసింది.మీడియా యొక్క మూడు ప్రాథమిక రకాలు బేసల్ మీడియా, తగ్గిన సీరం మీడియా మరియు సీరమ్-ఫ్రీ మీడియా, మరియు సీరమ్ సప్లిమెంటేషన్ కోసం వాటికి వేర్వేరు అవసరాలు ఉన్నాయి.

2.1.1 ప్రాథమిక మాధ్యమం
గిబ్కో సెల్ కల్చర్ మాధ్యమం
అమైనో ఆమ్లాలు, విటమిన్లు, అకర్బన లవణాలు మరియు కార్బన్ మూలాలు (గ్లూకోజ్ వంటివి) కలిగిన ప్రాథమిక మాధ్యమంలో చాలా కణ తంతువులు బాగా పెరుగుతాయి, అయితే ఈ ప్రాథమిక మీడియా సూత్రీకరణలు తప్పనిసరిగా సీరంతో అనుబంధంగా ఉండాలి.

2.1.2 తగ్గిన సీరం మాధ్యమం
గిబ్కో తక్కువ సీరం మీడియంతో బాటిల్
సెల్ కల్చర్ ప్రయోగాలలో సీరం యొక్క ప్రతికూల ప్రభావాలను తగ్గించడానికి మరొక వ్యూహం సీరం-తగ్గించిన మీడియాను ఉపయోగించడం.తగ్గిన సీరం మాధ్యమం అనేది పోషకాలు మరియు జంతు-ఉత్పన్న కారకాలతో కూడిన ప్రాథమిక మాధ్యమం సూత్రం, ఇది అవసరమైన సీరం మొత్తాన్ని తగ్గిస్తుంది.

2.1.3 సీరం లేని మాధ్యమం
గిబ్కో సీరం లేని మాధ్యమంతో బాటిల్
సీరమ్-ఫ్రీ మీడియం (SFM) సరైన పోషకాహారం మరియు హార్మోన్ సూత్రీకరణలతో సీరమ్‌ను భర్తీ చేయడం ద్వారా జంతు సీరం వాడకాన్ని తప్పించుకుంటుంది.చైనీస్ హాంస్టర్ ఓవరీ (CHO) రీకాంబినెంట్ ప్రొటీన్ ప్రొడక్షన్ లైన్, వివిధ హైబ్రిడోమా సెల్ లైన్లు, క్రిమి పంక్తులు Sf9 మరియు Sf21 (స్పోడోప్టెరా ఫ్రూగిపెర్డా), అలాగే వైరస్ ఉత్పత్తికి హోస్ట్‌తో సహా అనేక ప్రాథమిక సంస్కృతులు మరియు కణ తంతువులు సీరం-రహిత మాధ్యమ సూత్రీకరణలను కలిగి ఉన్నాయి. (ఉదాహరణకు, 293, VERO, MDCK, MDBK), మొదలైనవి. సీరం-రహిత మాధ్యమాన్ని ఉపయోగించడం యొక్క ప్రధాన ప్రయోజనాల్లో ఒకటి, సరైన వృద్ధి కారకాల కలయికను ఎంచుకోవడం ద్వారా నిర్దిష్ట సెల్ రకాల కోసం మాధ్యమాన్ని ఎంపిక చేయగల సామర్థ్యం.కింది పట్టిక సీరం రహిత మీడియా యొక్క ప్రయోజనాలు మరియు అప్రయోజనాలను జాబితా చేస్తుంది.

అడ్వాంటేజ్
స్పష్టత పెంచండి
మరింత స్థిరమైన పనితీరు
సులభమైన శుద్దీకరణ మరియు దిగువ ప్రాసెసింగ్
సెల్ పనితీరును ఖచ్చితంగా అంచనా వేయండి
ఉత్పాదకతను పెంచండి
శారీరక ప్రతిచర్యలపై మెరుగైన నియంత్రణ
మెరుగైన సెల్ మీడియా గుర్తింపు
ప్రతికూలత
సెల్ రకం నిర్దిష్ట మీడియం ఫార్ములా అవసరాలు
అధిక రియాజెంట్ స్వచ్ఛత అవసరం
వృద్ధిలో మందగమనం

2.2.1 pH స్థాయి
చాలా సాధారణ క్షీరద కణ తంతువులు pH 7.4 వద్ద బాగా పెరుగుతాయి మరియు వివిధ సెల్ లైన్ల మధ్య తేడాలు తక్కువగా ఉంటాయి.అయినప్పటికీ, కొన్ని రూపాంతరం చెందిన సెల్ లైన్లు కొద్దిగా ఆమ్ల వాతావరణంలో (pH 7.0 - 7.4) మెరుగ్గా పెరుగుతాయని చూపబడింది, అయితే కొన్ని సాధారణ ఫైబ్రోబ్లాస్ట్ సెల్ లైన్లు కొద్దిగా ఆల్కలీన్ వాతావరణాన్ని (pH 7.4 - 7.7) ఇష్టపడతాయి.Sf9 మరియు Sf21 వంటి క్రిమి కణ తంతువులు pH 6.2 వద్ద బాగా పెరుగుతాయి.

2.2.2 CO2 స్థాయి
వృద్ధి మాధ్యమం సంస్కృతి యొక్క pHని నియంత్రిస్తుంది మరియు pHలో మార్పులను నిరోధించడానికి సంస్కృతిలోని కణాలను బఫర్ చేస్తుంది.సాధారణంగా, ఈ బఫరింగ్ సేంద్రీయ (ఉదాహరణకు, HEPES) లేదా CO2-బైకార్బోనేట్-ఆధారిత బఫర్‌లను కలిగి ఉండటం ద్వారా సాధించబడుతుంది.మీడియం యొక్క pH కరిగిన కార్బన్ డయాక్సైడ్ (CO2) మరియు బైకార్బోనేట్ (HCO3-) యొక్క సున్నితమైన సమతుల్యతపై ఆధారపడి ఉంటుంది కాబట్టి, వాతావరణ CO2లో మార్పులు మాధ్యమం యొక్క pHని మారుస్తాయి.అందువల్ల, CO2-బైకార్బోనేట్-ఆధారిత బఫర్‌తో బఫర్ చేయబడిన మాధ్యమాన్ని ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, ఎక్సోజనస్ CO2ని ఉపయోగించడం అవసరం, ప్రత్యేకించి ఓపెన్ కల్చర్ డిష్‌లలో కణాలను కల్చర్ చేసేటప్పుడు లేదా అధిక సాంద్రతలలో రూపాంతరం చెందిన సెల్ లైన్‌లను కల్చర్ చేసేటప్పుడు.చాలా మంది పరిశోధకులు సాధారణంగా గాలిలో 5-7% CO2ని ఉపయోగిస్తున్నప్పటికీ, చాలా సెల్ కల్చర్ ప్రయోగాలు సాధారణంగా 4-10% CO2ని ఉపయోగిస్తాయి.అయితే, ప్రతి మాధ్యమం సరైన pH మరియు ద్రవాభిసరణ పీడనాన్ని సాధించడానికి సిఫార్సు చేయబడిన CO2 టెన్షన్ మరియు బైకార్బోనేట్ గాఢతను కలిగి ఉంటుంది;మరింత సమాచారం కోసం, దయచేసి మీడియం తయారీదారు సూచనలను చూడండి.

2.3 ప్లాస్టిక్‌లను పండించడం
సెల్ కల్చర్ ప్లాస్టిక్‌లు వివిధ సెల్ కల్చర్ అప్లికేషన్‌లకు సరిపోయేలా వివిధ రకాల రూపాలు, పరిమాణాలు మరియు ఉపరితలాలలో అందుబాటులో ఉన్నాయి.మీ సెల్ కల్చర్ అప్లికేషన్ కోసం సరైన ప్లాస్టిక్‌ను ఎంచుకోవడంలో మీకు సహాయపడటానికి దిగువ సెల్ కల్చర్ ప్లాస్టిక్ సర్ఫేస్ గైడ్ మరియు సెల్ కల్చర్ కంటైనర్ గైడ్‌ని ఉపయోగించండి.
అన్ని థర్మో సైంటిఫిక్ Nunc సెల్ కల్చర్ ప్లాస్టిక్‌లను వీక్షించండి (ప్రకటనల లింక్)

2.4 ఉష్ణోగ్రత
కణ సంస్కృతికి సరైన ఉష్ణోగ్రత చాలా వరకు కణాలు వేరుచేయబడిన అతిధేయ శరీర ఉష్ణోగ్రతపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు కొంతవరకు ఉష్ణోగ్రతలో శరీర నిర్మాణ మార్పులపై ఆధారపడి ఉంటుంది (ఉదాహరణకు, చర్మ ఉష్ణోగ్రత అస్థిపంజర కండరాల కంటే తక్కువగా ఉండవచ్చు. )కణ సంస్కృతికి, వేడెక్కడం కంటే వేడెక్కడం చాలా తీవ్రమైన సమస్య.అందువల్ల, ఇంక్యుబేటర్‌లోని ఉష్ణోగ్రత సాధారణంగా వాంఛనీయ ఉష్ణోగ్రత కంటే కొంచెం తక్కువగా సెట్ చేయబడుతుంది.

2.4.1 వివిధ సెల్ లైన్ల కోసం వాంఛనీయ ఉష్ణోగ్రత
సరైన పెరుగుదల కోసం చాలా మానవ మరియు క్షీరద కణ తంతువులు 36 ° C నుండి 37 ° C వరకు ఉంచబడతాయి.
సరైన పెరుగుదల కోసం కీటక కణాలు 27 ° C వద్ద సాగు చేయబడతాయి;అవి తక్కువ ఉష్ణోగ్రతలు మరియు 27°C మరియు 30°C మధ్య ఉష్ణోగ్రతల వద్ద మరింత నెమ్మదిగా పెరుగుతాయి.30°C పైన, కీటకాల కణాల జీవశక్తి తగ్గుతుంది, అది 27°Cకి తిరిగి వచ్చినా, కణాలు కోలుకోవు.
ఏవియన్ సెల్ లైన్లు గరిష్ట పెరుగుదలను చేరుకోవడానికి 38.5°C అవసరం.ఈ కణాలను 37°C వద్ద ఉంచగలిగినప్పటికీ, అవి మరింత నెమ్మదిగా పెరుగుతాయి.
కోల్డ్ బ్లడెడ్ జంతువుల నుండి (ఉభయచరాలు, చల్లని నీటి చేపలు వంటివి) ఉత్పన్నమైన సెల్ లైన్లు 15°C నుండి 26°C వరకు విస్తృత ఉష్ణోగ్రత పరిధిని తట్టుకోగలవు.